50L进样针（上海安亭微量进样器厂）。
上述结果说明连作能显著影响百香果根区土壤细菌群落的多样性。声明：本文所用图片、文字来源《热带作物学报》，版权归原作者所有。
Shannon指数和Simpson指数反映样本中细菌群落的多样性程度，Shannon值越大，表明细菌多样性越高，Simpson指数值越大，表明细菌优势度越高，均匀性越低，多样性越低。Ace和Chao指数反映细菌群落的丰富度程度，指数值越高，样本细菌丰富度越高。Shannon多样性指数曲线随着样本测序数据的增加，最终趋于平坦(图1b)，说明测序数据能反映样本中绝大多数的微生物多样性信息。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除笔者前期对该基地不同连作年限百香果的农艺性状的调查结果显示，随着连作年限的增加，百香果叶片和果实的染病率及病害程度均显著增加，同时其果实大小、单株结果量及产量均显著降低。
为探明百香果连作对土壤细菌群落结构和多样性的影响，本研究以种植台农1号百香果1年(TF)、2年(TS)、3年(TT)、4年(TFo)及0年(撂荒地，TZ)的土壤为材料，利用Illumina 高通量测序技术对不同种植年限土壤细菌群落结构及多样性开展分析研究。细菌种群在土壤健康和植物的生长中起着重要作用，而作物的连作对其有着显著的影响。并计算出了2，3，5-三甲基吡嗪在花生油中的本底值，进而建立一个通过测定花生油中2，3，5-三甲基吡嗪含量来判断花生油是否进行以2，3，5-三甲基吡嗪为主要增香成分的香精类掺伪的可行的测定方法，并进行了方法学确证。
如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：2，3，5-三甲基吡嗪，2-乙酰噻唑，花生油，香精。平行测定20次大豆油的2，3，5-三甲基吡嗪空白值，根据GB/T27404-2008计算得出测定低限为26.507g/L。4、实际样品测定对购买于市场的6个花生油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量进行测定，不同种类的花生油香精最佳使用浓度范围，制定合适的浓度梯度，用大豆油稀释花生油香精到适合的浓度，在50mL离心管中混和均匀，备用。测定结果参见表4，由表中可知，2，3，5-三甲基吡嗪的含量均低于本底值618g/L。
以上研究结果与本文的研究结果相吻合。目标化合物比对NIST谱库后的得分高低、箱线图分散性大小，并不能完全成为确立目标化合物的仅有数据，化合物在对齐期间还存在条目标注错误以及统计分析期间结果假阳性的可能，此时需要提取采集的原始数据信息来验证所选的目标化合物是真实存在的化合物。
对拟定本底值和掺伪植物油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量进行t检验分析，结果显示t=3.42＞2.57（t0.025/5），P＜0.05，说明在95%置信水平下，拟定本底值和掺伪植物油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量差异显著，拟定的本底值具有代表性三、结论本文采用顶空气相色谱-飞行时间质谱对花生油、大豆油和掺加花生油香精大豆油的挥发性成分进行采集，结合化学计量学分析的组学分析方法对数据进行逐步过滤和分析研究，确定出响应强度高、线性关系好、定量准确性高、测定相对最为稳定的差异化合物2，3，5-三甲基吡嗪作为花生油中花生油香精掺伪的定量标记化合物，2-乙酰噻唑、乙酰吡嗪和2-乙酰基吡啶作为定性标记化合物参考使用。目标化合物比对NIST谱库后的得分高低、箱线图分散性大小，并不能完全成为确立目标化合物的仅有数据，化合物在对齐期间还存在条目标注错误以及统计分析期间结果假阳性的可能，此时需要提取采集的原始数据信息来验证所选的目标化合物是真实存在的化合物。对以上三个水平的数据计算加标回收率，回收率范围参见表3，均符合GB/T27404-2008的方法学要求。
以上研究结果与本文的研究结果相吻合。对拟定本底值和花生油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量进行t检验分析，结果显示t=13.42＞2.09（t0.025/19），P＜0.05，说明在95%置信水平下，拟定本底值和26个花生油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量差异显著，也就是说，拟定的本底值具有代表性。图5为4个目标化合物在15个原始数据中的提取色谱图，由图可知4个目标化合物在掺加花生油香精大豆油与大豆油和花生油中均具有明显差异，其中a）中2，3，5-三甲基吡嗪的提取色谱图在3种植物油的峰面积上差异较为明显，不仅在花生油中存在，且在6种掺加花生油香精大豆油中均存在。根据GB/T27404-2008，选取测定低限、本底值、5000g/L三个水平进行重复6次的2，3，5-三甲基吡嗪浓度值测定，计算得出变异系数参见表3，以上精密度的数据均符合GB/T27404-2008的方法学要求。
平行测定20次大豆油的2，3，5-三甲基吡嗪空白值，根据GB/T27404-2008计算得出测定低限为26.507g/L。综上所述，以2，3，5-三甲基吡嗪的本底值为618g/L来考量，6个花生油均不是以2，3，5-三甲基吡嗪为主要增香成分的含有花生油香精的掺伪花生油。
王李平等、胡为等分别使用SPSS统计软件、Matlab软件编程的方法对气相质谱GC-MS得到的数据进行研究分析，得出包括2，3，5-三甲基吡嗪在内的花生油香精特征成分组。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。
测定26个花生油的2，3，5-三甲基吡嗪的响应值，带入标准曲线得出浓度值的平均值为253.948g/L，计算26个数据的3倍标准偏差与斜率（3*SD/k）的比值为363.940g/L，本文认为用两者之和表征花生油的2，3，5-三甲基吡嗪拟定本底值较为合理，本底值为618g/L（表3）。选取10位评鉴员，独立进行嗅觉检验法的感官实验，评选出最适应普遍嗅觉系统的浓度值，也就是最接近日常销售花生油嗅觉的浓度值。并计算出了2，3，5-三甲基吡嗪在花生油中的本底值，进而建立一个通过测定花生油中2，3，5-三甲基吡嗪含量来判断花生油是否进行以2，3，5-三甲基吡嗪为主要增香成分的香精类掺伪的可行的测定方法，并进行了方法学确证。3、目标化合物的方法学确证用大豆油稀释2，3，5-三甲基吡嗪标准物质，制作浓度梯度分别为10、30、100、500、1000、5000、10000、20000、50000g/L的标准曲线并使用合适的条件测定，得出标准曲线的回归方程为：Y=338.992X-453.751，线性相关系数（r2）为0.997。于丛丛等、喻晴等的研究表明，2，3，5-三甲基吡嗪在花生油中也是广泛存在的。测定6个掺加花生油香精大豆油中2，3，5-三甲基吡嗪的浓度值，计算所得平均值为5458.601g/L，标准偏差为3465.126g/L，平均值约为花生油平均值的21.5倍，约为拟定本底值的8.8倍。
测定结果参见表4，由表中可知，2，3，5-三甲基吡嗪的含量均低于本底值618g/L。通过以上分析，将目标化合物2，3，5-三甲基吡嗪确立为最终的定量标记化合物。
如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：2，3，5-三甲基吡嗪，2-乙酰噻唑，花生油，香精。由于2，3，5-三甲基吡嗪在花生油中也是广泛存在的，测定花生油中2，3，5-三甲基吡嗪的本底值就是测定方法建立的关键一环。
本文建立的方法具有可操作性强、试剂使用少、便捷快速、准确性高、应用范围广的优点，为香精类的花生油掺伪判断提供一种可行的测定方法，也为花生油的原料采购、企业生产、质量控制和市场监管提供一定的应用价值和技术支持，更为其他类的植物油香精类掺伪提供可行的参考。4、实际样品测定对购买于市场的6个花生油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量进行测定，不同种类的花生油香精最佳使用浓度范围，制定合适的浓度梯度，用大豆油稀释花生油香精到适合的浓度，在50mL离心管中混和均匀，备用。
对拟定本底值和掺伪植物油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量进行t检验分析，结果显示t=3.42＞2.57（t0.025/5），P＜0.05，说明在95%置信水平下，拟定本底值和掺伪植物油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量差异显著，拟定的本底值具有代表性图4为4个目标化合物的箱线图（Box-WhiskerPlot），可以显示数据的分散情况，a）中2，3，5-三甲基吡嗪的数据分散性较其他3个目标化合物较小，说明2，3，5-三甲基吡嗪在6个掺加花生油香精大豆油中数据分散性较小，作为目标化合物的可能性较高。图2为最终的15个目标条目轮廓图。图3中，b）上半部分为2，3，5-三甲基吡嗪实际测定结果，下半部分为谱库检索结果，上述的比对结果表明，4个目标化合物的特征性碎片离子与谱库中的数据均较为吻合。
如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：2，3，5-三甲基吡嗪，2-乙酰噻唑，花生油。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。
在掺加花生油香精大豆油与花生油比较上调的条目中，得到23个在3个样品组之间具有显著性差异的条目，再进行样品变异性过滤（至少两个组＜10%），最终保留了15个在掺加花生油香精大豆油中与花生油和大豆油具有显著性差异的条目。3种植物油的总离子流色谱图参见图1，由图可知，3种植物油在色谱峰数量、保留时间、峰面积大小上都有所不同，这为后续进一步分析的可能性提供依据。
得分大于80分的目标条目在NIST谱库的检索结果和比对结果参见图4，按照得分高低，它们分别是2，3，5-三甲基吡嗪、2-乙酰噻唑、乙酰吡嗪和2-乙酰基吡啶（又名1-（2-吡啶基）乙酮）。2、确立标记化合物植物油的挥发性成分是影响植物油感官的重要因素。
将大豆油、花生油和配置好的含有特定浓度的花生油香精的掺伪大豆油样品按不同种类的花生油香精最佳使用浓度范围，制定合适的浓度梯度，用大豆油稀释花生油香精到适合的浓度，在50mL离心管中混和均匀，备用。将这些数据导入AgilentMassHunterProfinder定性分析软件，依次进行出现频率过滤（至少一个组80%）、方差分析过滤（ANOVA，P0.01）、倍数变化过滤（FC2）。由表可知得分大于80分的条目有4个，得分大于90分的条目仅有1个。挥发性成分中含有数千种化合物，因而需要合适的分离条件来提高实验的灵敏度和分离度，只有尽可能准确的分离出这些化合物才能保证寻找到理想的标记化合物。
选取10位评鉴员，独立进行嗅觉检验法的感官实验，评选出最适应普遍嗅觉系统的浓度值，也就是最接近日常销售花生油嗅觉的浓度值随机测定，使用Q-TOFGC/MS在TOF扫描模式下采集原始数据。表2是过滤后15个目标条目中得分超过65分的10个比对NIST谱库得到的目标化合物检索信息，表中条目的得分越高说明与NIST谱库中的化合物越接近
声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。图2为最终的15个目标条目轮廓图。
3种植物油的总离子流色谱图参见图1，由图可知，3种植物油在色谱峰数量、保留时间、峰面积大小上都有所不同，这为后续进一步分析的可能性提供依据。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：2，3，5-三甲基吡嗪，2-乙酰噻唑，花生油。
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